Способы моделирования язвы желудка

Аннотация:

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии. Выполняют лапаротомию. Осуществляют воздействие уксусной кислотой на стенку желудка. При этом выполняют верхнюю срединную мини-лапаротомию. Вводят через пасть животного устройство для интраорганных внутрипросветных инъекций в просвет органа-мишени. Устанавливают ограничитель хода инъктора на 0,5 мм, что соответствует глубине инъекции, в стенку органов-мишеней со стороны слизистой осуществляют инъекцию 70% раствора уксусной кислоты. При этом контролируют целостность серозной оболочки органов-мишеней из мини-лапаротомной раны. Способ позволяет надежно и малотравматично моделировать язву желудка и двенадцатиперстной кишки у мелких лабораторных животных. 5 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно: к экспериментальной хирургии и может быть использовано для исследования влияния различных патогенетических факторов и лекарственных препаратов на формирование и течение язвенного дефекта, в том числе и на процессы регенерации стенки желудка и двенадцатиперстной кишки у мелких лабораторных животных, в частности, у белых беспородных крыс.

Известны различные способы моделирования язвы желудка в эксперименте.

В частности, известен и наиболее часто применяется в различных модификациях способ моделирования язвы в эксперименте, предложенный Okabe S. с соавт., включающий лапаротомию, нанесение 100% уксусной кислоты на серозную оболочку стенки желудка или двенадцатиперстной кишки с последующей экспозицией для желудка — 60 секунд, а для двенадцатиперстной кишки — 30 секунд. После чего обработанную уксусной кислотой поверхность высушивают и зашивают брюшную полость. Через 3 суток в зоне, обработанной уксусной кислотой, формируется язвенный дефект с вовлечением всех слоев стенки органа [Okabe S., Pfeiffer C.J., Roth J.L.R. A method for experimental penetrating gastric and duodenal ulcers in rats / S. Okabe, C.J. Pfeiffer, J.L.R. Roth // Am. J. Dig. Dis. — 1971. — №16. — p. 277-284].

Однако известный способ имеет следующие недостатки: 1) лапаротомия увеличивает травматичность эксперимента, а, следовательно, влияет на формирование язвы в зоне альтерации стенки желудка; 2) полноценная язва возникает лишь спустя трое суток после операции, поскольку повреждение формируется со стороны серозной оболочки; 3) противоестественность формирования язвенного дефекта со стороны серозной оболочки, что не соответствует возникновению язвы у человека, когда процесс язвообразования начинается со слизистой оболочки, а серозная вовлекается в последнюю очередь; 4) способ имеет ограничение по локализации моделирования язвенного дефекта, в частности, на задней стенке луковицы двенадцатиперстной кишки и малой кривизне желудка, что сужает спектр изучения осложнений язвы, в том числе перфорации и кровотечения.

Наиболее близким по совокупности существенных признаков к предлагаемому способу является способ моделирования язвы желудка в эксперименте, предложенный Шалимовым С.А. с соавт., включающий механическое повреждение слизистого слоя стенки желудка [Шалимов С.А., Радзиховский А.П., Кейсевич Л.В. Руководство по экспериментальной хирургии / С.А. Шалимов, А.П. Радзиховский, Л.В. Кейсевич // М.: Медицина, 1989. — С. 174].

Способ осуществляют следующим образом: под внутримышечным наркозом экспериментальному животному выполняют лапаротомию, гастротомию, после чего проводят иссечение участка слизистой оболочки по задней стенки желудка с обнажением мышечного слоя. Площадь повреждения составляет 0,5 см2.

Однако известный способ имеет следующие недостатки: 1) лапаротомия и гастротомия увеличивают травматичность эксперимента, а, следовательно, влияют на течение репаративных процессов в зоне альтерации стенки желудка; 2) способ имеет ограничение по локализации моделирования язвенного дефекта (задняя стенка желудка), что сужает спектр изучения осложнений язвы, в том числе перфорации; 3) способ не предусматривает моделирования острого язвенного кровотечения, так как мышечный слой в стенке желудка не повреждается; 4) быстрая эпителизация дефекта слизистой, составляющая 24-48 ч.

Исходя из вышеизложенного, задачей данного изобретения является создание надежного малотравматичного способа моделирования язвы желудка и двенадцатиперстной кишки у мелких лабораторных животных.

Поставленная задача решается тем, что в эксперименте производится внутрипросветное введение 70% раствора уксусной кислоты в полость желудка с последующим воздействием на слизистую оболочку.

На фиг. 1 показано схематичное изображение УДИВИ.

На фиг. 2 показан этап верхней срединной мини-лапаротомии с выведением в рану органа-мишени (желудок, ДНК);

на фиг. 3 изображен этап введения наружной трубки (тубуса) УДИВИ;

на фиг. 4 показан вид расположения торцовой части тубуса УДИВИ в желудок или ДНК контролируемый из мини-лапаротомной раны.

на фиг. 5 показан завершающий этап введения раствора уксусной кислоты через инъектор.

Где: 1 — стандартная игла для внутримышечных инъекций, 2 — внутренняя трубка поверх иглы для внутримышечных инъекций, 3 — ограничитель хода внутренней трубки, 4 — стандартная укороченная инсулиновая игла, 5 — тубус (наружная трубка), 6 — мини-лапаротомная рана, 7 — желудок, 8 — двенадцатиперстная кишка, 9. — торцовая часть УДИВИ, 10. — стандартный инсулиновый шприц, 11 — острие укороченной инсулиновой иглы, имеющей скос 45°.

Способ осуществляют следующим образом.

В эксперимент берут животных через 24 часа после приема пищи при свободном доступе к воде. Операцию проводят под общим наркозом с использованием диэтилового эфира. После обработки операционного поля в асептических условиях производят верхнюю срединную мини-лапаротомию (длиной 1-1,5 см), в рану выводят орган (желудок, ДНК). Через пасть и пищевод в просвет желудка или двенадцатиперстной кишки вводят тубус устройства для интраорганных внутрипросветных инъекций (далее УДИВИ), торец тубуса со стороны слизистой упирается в заданный участок стенки органа-мишени, контроль локализации торца тубуса осуществляют со стороны мини-лапаротомной раны, далее в просвет тубуса вводят инъектор, заполненный раствором 70% уксусной кислоты, ограничитель хода расположенный на проксимальной части инъектора устанавливают на 0,5 мм, что соответствует глубине инъекции, после того как инсулиновая игла проникает в стенку органа-мишени инсулиновым шприцом с делением 0,01 мл вводят заданный объем раствора, при этом контролируя целостность серозной оболочки органа-мишени из мини-лапаротомной раны. После проведения инъекции УДИВИ удаляют из просвета желудочно-кишечного тракта. Мини-лапаротомную рану послойно ушивают наглухо.

Предлагаемый способ моделирования язвы желудка и двенадцатиперстной кишки у мелких лабораторных животных, в отличие от других способов, имеет следующие преимущества: 1) уменьшение размеров лапаротомной раны (мини-лапаротомия) способствует снижению болевого синдрома после операции, ранней активизации животных, снижение риска развития гнойно-септических осложнений со стороны послеоперационной раны; 2) позволяет моделировать язву запрограммированной (любой отдел желудка и ДНК) локализации, за счет возможности производить инъекцию раствора в строго заданную зону под мини-лапаротомным контролем; 3) позволяет моделировать язву запрограммированной глубины поражения за счет применения ограничителя хода УДИВИ; 4) предусматривает моделирование осложнений язвы (кровотечение, перфорация, стеноз) за счет изменения объема вводимого раствора в стенку органа.

По указанному способу в ОмГМУ на базе кафедры топографической анатомии и оперативной хирургии произведено моделирование язв желудка и двенадцатиперстной кишки у 24 лабораторных белых крыс, определены критические объемы вводимого 70% раствора уксусной кислоты, при которых происходит тотальный некроз стенки органа, определены сроки заживления сформированных язв.

Способ моделирования язвы желудка и двенадцатиперстной кишки у мелких лабораторных животных, включающий лапаротомию, воздействие уксусной кислотой на стенку желудка, отличающийся тем, что выполняют верхнюю срединную мини-лапаротомию, вводят через пасть животного устройство для интраорганных внутрипросветных инъекций в просвет органа-мишени, устанавливают ограничитель хода инъектора на 0,5 мм, что соответствует глубине инъекции, в стенку органов-мишеней со стороны слизистой осуществляют инъекцию 70% раствора уксусной кислоты, при этом контролируют целостность серозной оболочки органов-мишеней из мини-лапаротомной раны.
Способ моделирования язвы желудка и двенадцатиперстной кишки у мелких лабораторных животных

Источник

Изобретение относится к экспериментальной физиологии, медицине. Сущность: животному проводят инфильтрационную анестезию в паравертебральной области с двух сторон, а затем осуществляют механическое воздействие на позвоночник на уровне Th10 — L5, при этом производят смещение позвонка влево или вправо относительно оси позвоночника на 0,3 — 0,8 см и затем фиксируют это положение позвонков в корсете в течение 1 — 1,5 недель. Способ позволяет моделировать язвенную болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки в эксперименте.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть применено при моделировании язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.

Известен способ моделирования язвенной болезни желудка путем помещения животного в камеру с содержанием углекислого газа 11,40,4 на семь дней [1] Известен способ моделирования язвенной болезни желудка, принятый за прототип, заключающийся во введении в стенку желудка 0,1 мл 3 раствора перекиси водорода [2] Однако известный способ не позволяет получить патогенетически адекватную модель язвенной болезни.

Целью изобретения является приближение к клиническому течению за счет полноты воспроизведения патогенетических механизмов.

Поставленная цель достигается тем, что в способе моделирования язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки путем воздействия на мышечно-связочный аппарат экспериментального животного воздействие осуществляют на мышечно-связочный аппарат позвоночника на уровне Th10 — L5, при этом производят смещение этих позвонков влево или вправо относительно оси позвоночника на 0,3 0,5 см и затем фиксируют это положение позвонков в течение 1 1,5 недель.

Способ осуществляют следующим образом.

Экспериментальное животное, например собаку, устанавливают в станок, фиксируя ремнями положение конечностей и шею. Проводят инфильтрационную анестезию мягких тканей спины по обеим паравертебральным линиям 0,5 раствором новокаина. Через 10 15 мин производят смещение позвонков на уровне Th10 L5 влево или вправо относительно оси позвоночника на 0,3 — 0,8 см. Далее берут корсет, состоящий из двух опорных ремней и одного корригирующего ремня, фиксированного концами с возможностью перемещения к опорным ремням и имеющего перемещающийся пелет (или несколько пелетов). Пелет корригирующего ремня устанавливают со стороны смещения позвонка, укрепляя на остистом или поперечном отростке соответствующего позвонка. Фиксируют на туловище животного опорные ремни и в течение 1 1,5 недель корсет фиксирует неправильное положение позвонка, отклоненного на 0,3 0,8 см от оси позвоночника. Животное начинает прогрессивно худеть, теряет подвижность, у него вылезает шерсть, появляется мелена. При вскрытии через 1 1,5 недели в стенке желудка (при смещении позвонка влево от оси позвоночника) или в стенке 12-перстной кишки (при смещении позвонка вправо от оси позвоночника) обнаруживается язвенный дефект размером 0,3 1,0 см различной глубины, кровоточащий. При гистологическом исследовании отмечается инфильтрация стенки сегментоядерными лейкоцитами, участки распада слизистого и мышечного слоя, дистрофические процессы в мышечной оболочке стенки желудка и двенадцатиперстной кишки.

Способ подтверждается следующими примерами.

Пример 1. Собака Кузя, беспородная, кобель.

Устанавливают в станке и проводят инфильтрационную анестезию мягких тканей спины по обеим паравертебральным линиям 0,5 раствором новокаина. Через 10 мин производят смещение позвонков на уровне L5 влево большим пальцем правой руки экспериментатора или любой металлической пластиной размером, не превышающей размер тела позвонка. Отклонение тела позвонка от оси позвоночника, как показало R-скопическое исследование, составляет 0,3 см. Далее на позвонок устанавливают со стороны смещения пелет, фиксируя стенозированное и ротированное положение позвонка, и укрепляют положение пелета опорными и корригирующими ремнями.

Через 2 ч после операции животное вялое, неохотно пьет, пищу не принимает. На следующий день мелена. Животное вялое, неопрятное, шерсть теряет блеск. Через неделю после операции мелена, животное резко худеет, неохотно ест, шерсть выпадает. При R-графическом исследовании обнаружен язвенный дефект стенки желудка.

При гистологическом исследовании: участки распада слизистой и мышечного слоя, дистрофические изменения пограничного слоя мышц, лейкоцитарная инфильтрация, дно язвы налет фибрина, десквамиpованный эпителий.

Пример 2. Собака Рыжий, беспородный, кобель.

Устанавливают животное в станке, проводят инфильтрационную анестезию мягких тканей по обеим парвертебральным линиям. Затем осуществляют смещение позвонков на уровне Th10 L1. Позвонок Th10 смещают на 0,5 см влево от оси позвоночника, а L1 на 0,5 см вправо от оси позвоночника. Смещенные положения позвонков фиксируют двумя пелетами корригирующего ремня корсета. Проводят R-графию позвоночника: отмечается спондиллолистез Th10 позвонка с ротацией его тела, отклонение тела позвонка от оси позвоночника на 0,5 см, спондиллолистез L1 позвонка с отклонением от оси позвоночника на 0,50 см. Далее фиксируют корсет на туловище животного в течение 1,5 недель, в течение которых животное потеряло до 20 веса, шерсть вылезает участками, на 2-е сутки и до конца исследования у животного мелена.

На R-грамме желудочно-кишечного тракта с барием (проведена через 1,5 недель от начала эксперимента) отмечается ниша в области антрального отдела желудка в виде выступа на контуре тени желудка, ниша рельефа слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки с неровными краями.

Гистологически: участки некроза в области тела желудка и двенадцатиперстной кишки, образованные бесстpуктурными некротическими массами, слизью, фибрином и десквамированным эпителием, в области дефекта 12-перстной кишки выявляется грануляционная ткань с лимфоплазмоцитарной инфильтрацией.

Пример 3. Собака Дружок, беспородная, кобель.

Устанавливают животное в станке, проводят инфильтрационную анестезию по обеим паравертебральным линиям. Затем осуществляют смещение позвонков на уровне L4, отклоняя его на 0,8 см вправо от оси позвоночника. Смещенное положение позвонков фиксируют пелетом корригирующего ремня корсета и фиксируют опорными ремнями. На R-грамме позвоночника отмечается спондиллолистез и ротация позвонка на уровне L4, отклонение тела позвонка от оси позвоночника на 0,8 см.

Корсет фиксируют на туловище животного в течение 1,5 недель, в течение которых у животного была мелена, беспокойство сменилось вялостью, апатией.

Через 1,5 недели на R-грамме желудочно-кишечного тракта отмечается ниша в области 12-перстной кишки.

Таким образом, у животного получена язва 12-перстной кишки.

Затем корсет был снят и мануальным приемом положение позвонка на уровне L4 было восстановлено. При R-графии позвоночника: положение позвонка L4 по оси позвоночника.

Животное стало активнее, через 3 дня исчезла мелена, восстановился аппетит. При R-исследовании желудочно-кишечного тракта рубцевание язвы.

Модель воспроизведена на 12 животных в проведенных 12 экспериментах. При дальнейшем восстановлении положения позвонков в 5 случаях язва подверглась обратному развитию.

Цель достигается за счет комплексного воздействия на иннервационный аппарат (афферентное, эфферентное, симпатическое) желудка и двенадцатиперстной кишки.

Формула изобретения

Способ моделирования язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, отличающийся тем, что воздействуют на мышечно-связочной аппарат позвоночника на уровне Тh10 L5, при этом производят смещение позвонка влево или вправо относительно оси позвоночника на 0,3-0,8 см и фиксируют это положение позвонков в корсете в течение 1-1,5 недель.

Источник

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при моделировании язвы желудка. Цель — приближение модели к клиническому течению за счет морфологического соответствия. Животному , наркотизированному гексеналом, вскрывают брюшную полость и в стенку желудка вводят 0,1 мл 3%-ного раствора перекиси водорода. Полученная модель отражает динамику функциональных и морфологических изменений в стенке желудка, наблюдаемых при развитии язвенной болезни у человека.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (им G 09 В 23/28

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР!

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ . К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4749175/14 (22) 16. f0.89 .(46) 15.11.91. Бюл.М42 (71) Институт биологии Бурятского филиала

СО АН СССР (72) С.М.Николаев, H.Н,Федотовских и

E.Ë.Òoëìa÷åâà (53) 615.475 (088.8) (56) S.0cabe. In: Peptic ulcer. вЂ” Copenhagen, 1971, р,13 вЂ” 20. (54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ЯЗВЫ

ЖЕЛУДКА

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в качестве способа моделирования язвенного поражения желудка.

Целью изобретения является .приближение модели к клиническому течению за счет морфологического соответствия..

Способ осуществляют следующим образом.

Животному вводят внутрибрюшинно стерильный раствор гексенала в дозе 50 мг/кг, проводят вскрытие брюшной полости и в стенку желудка с помощью инъекционных игл вводят 0,1 мл 3,0 ф,-ного раствора перекиси водорода (НгОг), после чего рану послойно зашивают. Операцию проводят в асептических условиях беэ дополнительного применения антибиотиков и сульфаниламидных препаратов. Через 7, 14, 21 и 28 суток после введения перекиси водорода оценивают функциональное состояние желудка с анализом структурной перестройки органа. Ы 1б91873 А1 (57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано при моделировании язвы желудка, Цель вЂ” приближение модели к клиническому течению за счет морфологического соответствия, Животному, наркотизированному гексеналом, вскрывают брюшную полость и в стенку желудка вводят 0,1 мл 3 -ного раствора перекиси водорода. Получен ная модель отражает динамику функциональных и морфологических изменений в стенке желудка, наблюдаемых при развитии язвенной болезни у человека, Функциональное состояние желудка оценивают î дебит-часу желудочной секреции желудка в мл на 100,0 r массы крыс эа 1 ч общей и свободной кислотности желудочного сока в ед. Михаэлиса, концентрации кислых мукополисахаридов в желудочном соке по реакции с альциановым синим, содержанию малонового диальдегида в гомогенате поврежденной ткани желудка в нмоль/г ткани, а также по скорости обратной диффузии водородных ионов в титрационных единицах.

При исследовании желудка белых крыс через 7 суток с момента введения перекиси водорода наблюдали сглаженный рельеф слизистой оболочки вокруг .язвенного дефекта, в краях язвы и на дне отмечали мелко- и крупноточечные кровоизлияния. Дно язвы было представлено слоем некротических масс. На 14-е сутки развития экспериментальной язвы у большинства животных наблюдали каилезно измененные края язаейного дефекта с кровоизлияниями. на дне язвы обнаружили некротические массы.

1591873

Спустя 21 сутки c»ai4a la 8!(cг)еримен) а 0)Iмечены сфармировавц иеся язвенные дефекты, склад.

28 сутки с момента введения перекиси водорода Визуально к?Экроскопическая )(артиНа мала отличалась 0 дзнных, отм8ченных на 21-6 Сутки ) Ibl I a.

M0Pf)0)10! IwGcKI)G РазмеРМ I,388)4140I дефекта определяли )ю «язвенному индексу, При Гиста)10Гичес:

QTGK слизистого и пад:лизистога слоев с

2)еикаци)арной инфильтрацией эт 1х аб«la» стей, а такж8 ча(тична мь)шечнОГО слОЯ, В них выявлены массиВные лейкоцитйрные инфильтраты вплоть До образования мел,:

Гранулацитарного ряда, ц2еди КОторых не» редко встречались и лимфоциты, единичные

l1лаэматич8ские клетки. Наряду с этим наблюдали гемодинамические изменения в со;удах. 3 области, при))ега)ащей к яэвенНОЙ поверхна

И1ЛМИ Bai

В ст р8ч а к2тся к исты.

Йа I-е ..;утки после ()г4едения пере,:(иси

ВОДО«)ог), ГИСТОЛОРИЧд«к«ал КВРТИ)1 2 В (2 )08 нам была такой же, как и на 14-8 сутки. с той лишь разницей что огмечены измене 4ля в (леточном cocтаве flel.,,!

4$ 0

30 дарада отражает характерные стадии развития язвенной болезни желудка у лю45

Встречались также плаэматические клетки и единичные лимфоциты. При окраске срезов по Ван-Гизону выявлены массивные раэрас гднил каллаг8нов61 (волокон.

Спустя 28 суто». после осуществления способа наблюдали также некроэ ткани, уменьшилась интенсивность клеточной инфильтр-«öèè, соединительнотканныЕ элементы вЂ” более зрелые, язвенный дефект сформира вал сл, Способ подтверждается примером.

П р и м 8, .), Белую крысу-самку с массой» 170 г наркотиэируот внугрибрюшинным введением гексенала иэ расчета 50 мг/кг, через 5 вЂ” 7 мин животное фиксиру)ат на лабаратОриам операционном столике.Делают скальпелем разрез Длиной 2,5-3,5 см по белой (срединной) линии живота и вскрывают брюшную полость, ц аэу находят желудок, фиксируют его мягким пинцетом и в стенку желудка иньециру)от 6,1 мл свежего раствора перекиси водорода, После этога извлекают мягкий пинцет, а рану послойно зашивают шелком. Снаружи шов обрабатывают 5;4-ной настойкой йода.

Получена -pocTàÿ модель язвенного поражения желудка. В принципе динамика функциональных и морфалогических изменений при введении раствора перекиси водей. При этом наблюдаемые признаки лэвенного поражения желудка сходны с проявлениями язвенной болезни желудка у человека, Способ прост В осуществлении, не требует особых условий, при этом хорошо воспроизводим, даст воэможность получе- ния стандартных размеров язвенного дефекта, что является исключительно важным при оценке фармакотерапевтической эффективности новых лекарственных препаратов..

Формула изобретения

Способ моделирования язвы желудка путем воздействия химическими агентами на стенку желудка экспериментального жиВатнОГО, О т л и I а ю шийся тем, чтО, с целью приближе .!Ия модели I Способ моделирования язвы желудка