Солянокислый гематин в дне эрозий и язв желудка
Гемоглобиногенные пигменты (гематоидин)
Гематоидин — кристаллический не содержащий железа пигмент, имеющий вид ярко-оранжевых ромбических пластинок или иголок, реже зерен.
Эрозии желудка и двенадцатиперстной кишки
Он возникает при распаде эритроцитов и гемоглобина внутриклеточно, но в отличие от гемосидерина в клетках не остается и при гибели их оказывается свободно лежащим среди масс распада. Химически он идентичен билирубину. Образуется гематоидин в старых гематомах, рубцующихся инфарктах, причем его находят в центральных участках кровоизлияния вдали от живых тканей.
Гематины представляют собой окисленную форму гема и возникают при гидролизе оксигемоглобина. Они имеют вид темно-коричневых или черных ромбовидных кристаллов или зерен, дают двойное лучепреломление в поляризованном свете (анизотропны), содержат железо, но в связанном состоянии, растворимы в щелочах, малорастворимы в кислотах, обесцвечиваются перекисью водорода.
К выявляемым в тканях гематинам относят: малярийный пигмент (гемомеланин), солянокислый гематин (гемин) и формалиновый пигмент. Гистохимические свойства этих пигментов идентичны. Малярийный пигмент, (гемомеланин) возникает из простетической части гемоглобина под влиянием плазмодиев малярии, паразитирующих в эритроцитах.
Отщепление глобина сопровождается окислением гема и образованием внутри плазмодия пигмента в виде черно-бурых зерен. При разрушении эритроцитов малярийный пигмент попадает в кровь и подвергается фагоцитозу элементами ретикулоэндотелиальной системы. Селезенка, печень, костный мозг, лимфатические узлы, головной мозг (при малярийной коме) приобретают вследствие этого серо-аспидную окраску. В тех же органах наряду с малярийным пигментом наблюдается отложение гемосидерина.
Солянокислый гематин (гемин) образуется в эрозиях и язвах желудка под воздействием на гемоглобин ферментов желудочного сока и соляной кислоты. Область дефекта слизистой оболочки желудка приобретает буро-черный цвет. Кристаллы солянокислого гематина в поляризованном свете дают явления анизотропии и дихроизма. Формалиновый пигмент в виде темно-коричневых игл или гранул встречается в тканях при фиксации их в кислом формалине (формалиновый пигмент не образуется, если формалин имеет рН больше 6,0). Его считают производным гематина.
«Патологическая анатомия», А.И.Струков
Популярные статьи раздела
ГИСТОХИМИЯ ПИГМЕНТОВ
Термин «пигменты» охватывает группу веществ, поглощающих свет в видимом спектре и наблюдаемых в неокрашенных клетках и тканях. Под это определение подходят вещества различного происхождения, состава и функционального назначения. По происхождению пигменты можно разделить на экзогенные (в частности, угольная или известковая пыль, отложения металлов, химиотерапевтических веществ и др.) и эндогенные. Эндогенные пигменты разделяют на гематогенные (например, гемоглобин и его производные) и негематогенные, или аутогенные (например, меланин и жировые пигменты — липофусцины и каротиноиды).
В гистохимическом отношении пигменты мало различаются. Несмотря на то, что химический состав ряда пигментов выяснен не до конца, гистохимически их можно выявить с достаточно высокой степенью надежности, тем более что большинство из них имеет характерную тканевую локализацию.
Выявление гемосидерина и гемоглобина
Гемосидерин — железосодержащий пигмент, образующийся из гемоглобина в результате внутриклеточных превращений.
Для выявления гемоглобина пригодна реакция псевдопероксидазы с бензидином, а идентификация гемосидерина основана на определении содержащегося в нем железа с помощью реакции Перлса с кислым ферроцианидом.
Кроме того, гемосидерин дает положительную ШИК-реакцию, обусловленную его нахождением в белково-полисахаридном комплексе. Резко положительна реакция этого комплекса с тетразолием после бензотирования.
Выявление гемоглобина бензидином по Пикворту
1. Материал фиксируют в формалине, заливают в парафин.
2. Депарафинированные срезы доводят до воды.
3. Промывают в метаноле.
4. Перевернутое стекло со срезом помещают в раствор бензидина (0,2 г бензидина и маленький кристаллик нитропруссида натрия растворяют в 15 мл метанола, добавляют 4 капли ледяной уксусной кислоты и встряхивают) в чашке для окрашивания на 5-10 мин.
5. Смывают бензидин озонированным эфиром (50 мл 3 % перекиси водорода, 100 мл метанола и 50 мл эфира).
6. Помещают срез на 10 мин в свежую порцию озонированного эфира.
7. Промывают в проточной воде 10-15 мин.
8. Докрашивают ядра в 1% водном растворе нейтрального красного 3 мин.
9. Промывают, обезвоживают в спиртах, просветляют в ксилоле и заключают в дистрен-дибутил-ксилол.
Результат:
гемоглобин и некоторые «оксидазные» гранулы лейкоцитов окрашиваются в темно-синий цвет, ядра — в красный.
Трехцветный метод выявления билирубина, гемосидерина и липофусцина
по Гпеннеру
1. Срезы толщиной 10 мкм готовят в криостате, наклеивают на стекла и подсушивают при комнатной температуре.
2. Погружают на 5 мин в 2 % раствор гексацианоферрата калия.
3. Обрабатывают 20 мин свежеприготовленной смесью равных частей 2 % гексацианоферрата калия и 5 % уксусной кислоты.
4. Ополаскивают в проточной воде и обрабатывают в течение 15 мин 3 % раствором бихромата калия с рН 2,2.
5. Промывают в воде.
6. Окрашивают свежепрофильтрованным раствором жирового красного-О в изопропаноле 20мин.
7. Промывают в проточной воде в течение 5 мин.
8. Заключают в сироп Апати.
Результат:
липофусцины окрашиваются в оранжево-красный цвет,
гемосидерин — в синий,
билирубин — в темный изумрудно-зеленый.
Примечание.
Гемосидерин растворяется в кислотах, поэтому для его выявления не следует применять кислые фиксаторы .
Выявление желчных пигментов
Желчные пигменты, как и гемосидерин, являются продуктом разложения гемоглобина и других железосодержащих белков. Основные желчные пигменты — билирубин и биливердин — обладают кислотными свойствами и образуют со щелочноземельными металлами соли, не растворимые в воде. Их идентификация возможна с помощью окраски метиленовым синим, реакций Гмелина и Штейна. Реакция Гмелина основана на окислении билирубина азотной кислотой, а реакция Штейна — на окислении его йодом. Метод Штейна позволяет выявить все желчные пигменты.
Реакция с йодом на желчные пигменты по Штейну
1. Материал фиксируют в формалине или спирте, заливают в парафин.
2. Депарафинированные срезы доводят до воды.
3. Обрабатывают 12 — 18 ч йодным реактивом
(2 части раствора Люголя и 1 часть 10 % раствора йода на 96 % спирте).
4. Промывают в проточной воде 5 мин.
5. Обесцвечивают 5 % раствором тиосульфата натрия 30 с.
6. Промывают и докрашивают квасцовым кармином Майера 3-18 ч.
7. Промывают в воде, обезвоживают абсолютным ацетоном, просветляют в ксилоле и заключают в бальзам.
Результат:
желчные пигменты окрашиваются в темно-зеленый цвет,
ядра—в красный.
Выявление меланина
Меланин имеет сложную полимерную структуру и обычно окрашен в черно-коричневый цвет, хотя имеются и другие оттенки — до желтого и даже фиолетового. Как правило, он встречается в форме гранул — меланосом — в клетках тканей эктодермального происхождения — в эпидермисе, волосах, волосяных фолликулах, меланомах кожи, пигментном эпителии радужки, сетчатке. В нервной системе присутствует разновидность меланина — нейромеланин.
Меланин синтезируется в промеланосомах через окисление тирозина до ДОФА при участии тирозиназы и пероксидазы. На этом основаны методы специфического контрастирования и электронно-микроскопического гистохимического выявления промеланосом по положительной реакции на тирозиназу.
Выявление меланина основано на его способности образовывать комплексы с ионами двухвалентного железа, которые легко обнаруживаются гексацианоферратом калия в реакции турнбулевой сини. На этом принципе основан метод Лилли.
«Железный» метод выявления меланина
по Лилли
1. Материал фиксируют в различных смесях, заливают в парафин.
2. Депарафинированные срезы доводят до воды.
3. Помещают в 2,5 % раствор сульфата железа гептагидрата на 60 мин.
4. Промывают в 4 сменах дистиллированной воды по 5 мин.
5. Помещают в 1 % раствор гексацианоферрита (III) калия в 1 % уксусной кислоте на 30 мин.
6. Промывают в 1 % уксусной кислоте.
7. При желании докрашивают пикрофуксином по Ван-Гизону.
8. Проводят через спирт возрастающей концентрации и ксилол, заключают в бальзам.
Результат:
меланин окрашивается в темно-зеленый цвет на бесцветном фоне; такой же цвет имеет гемосидерин.
Меланин, как и липофусцин, обладает способностью восстанавливать раствор аммиачного серебра. На этом основан принцип электронно-микроскопического гистохимического выявления промеланосом и меланосом по Мисиме. Раздельное выявление меланина и липофусцина возможно по их разному окрашиванию нильским синим. Кроме того, липофусцин в отличие от меланина дает видимую собственную флюоресценцию в ультрафиолетовом свете.
Импрегнация серебром промеланосом и меланосом
по Мисиме
1. Маленькие кусочки ткани фиксируют в 10 % формальдегиде на фосфатном буфере (рН 7,4) в течение 1 ч при 4 «С.
2. Тщательно промывают в дистиллированной воде.
3. Инкубируют в растворе аммиачного серебра 40 — 60 мин при 58 °С.
4. Промывают в нескольких сменах дистиллированной воды.
5. Кусочки ткани помещают на 1 —2 мин в раствор трихлорида золота (5 мл 6 % тиосульфата натрия смешивают с 5 мл 6 % тиоцианата аммония и добавляют по каплям 2 % раствор трихлорида золота до образования розовато-красного осадка).
6. Кусочки ткани помещают сразу в 0,6 % раствор тиосульфата натрия на 8 мин.
7. Тщательно промывают в дистиллированной воде.
8. Дополнительно фиксируют в 0,6 % забуференном растворе перманганата калия или в 1 % забуференном растворе тетраоксида осмия (рН 7,4) 1 ч при 4 «С.
9. Обезвоживают и заливают.
Результат:
серебрятся меланосомы и премеланосомы.
Гранулярные отложения металлического серебра выявляются и в тех премеланосомах, в которых меланин не образуется (у альбиносов).
Выявление липофусцина и меланина с применением нильского синего
по Лилли
1. Материал фиксируют в любом фиксаторе, заливают в парафин.
2. Депарафинированные среды доводят до воды.
3. Окрашивают в течение 20 мин 0,05 % раствором нильского синего А в 1 % серной кислоте.
4. Промывают в проточной воде 10 — 20 мин.
5. Можно также быстро ополоснуть в 1 % растворе серной кислоты и обезводить в 4 порциях абсолютного ацетона.
6. Заключают после п. 3 в глицерин-желатин или после п. 4 проводят через ксилол и заключают в синтетическую среду.
Результат:
если обработка включала пп. 4 и 6, то липофусцины окрашиваются в темно-синий или зеленый цвет, меланин -в темно-зеленый; при обработке с включением пп. 5 и б меланин окрашивается в темно-зеленый цвет, а липофусцины сохраняют свою первоначальную окраску.
Метод дифференцировки меланина от липофусцина
по Хуэку
1. Материал фиксируют в любом фиксаторе, заливают в парафин.
2. Депарафинированные срезы помещают в дистиллированную воду.
3. Срезы окрашивают свежеприготовленным насыщенным водным раствором нильского синего 30мин.
4. Промывают в дистиллированной воде.
5. Обесцвечивают 10 % перекисью водорода 24 ч.
6. Промывают в проточной воде.
7. Заключают в глицерин-желатин.
Результат:
липофусцин окрашивается в синий цвет,
меланин в результате обработки перекисью водорода обесцвечивается.
Выявление жировых пигментов
Наряду с липофусцином к жировым пигментам относятся гемофусцин, цероид, псевдомеланин, железосодержащие липопигменты и каротиноиды.
Липофусцин обладает выраженной базофилией и сильной восстанавливающей способностью, на чем основана реакция Шморля — основная реакция на липофусцин. Липофусцин окрашивается также нильским синим.
Выявление кислотоустойчивых липофусцинов
по Цилю—Нильсену
1. Материал фиксируют в различных смесях, заливают в парафин.
2. Депарафинированные срезы доводят до дистиллированной воды.
3. Окрашивают срезы в течение 3 ч при 60 °С в растворе карбол-фуксина (10 г основного фуксина + 50 г фенола + 100 мл спирта + 1000 мл дистиллированной воды).
4. Промывают в проточной воде.
Эрозии антрального отдела желудка что это такое
Дифференцируют в 1 % солянокислом спирте до тех пор, пока эритроциты не станут розовыми.
6. Промывают в дистиллированной воде.
7. Докрашивают в железных квасцах или 0,5 % растворе
толуидинового синего.
8. Промывают в проточной воде.
9. Обезвоживают в спиртах возрастающей концентрации, проводят через ксилол, заключают в бальзам.
Результат:
кислотоустойчивые липофусцины окрашиваются в ярко-красный цвет, а липопротеиды приобретают красноватый оттенок; ядра окрашиваются в темно-синий или синий цвет.
Примечание.
Из-за базофилии липофусцинов слишком сильная докраска обусловливает развитие темно-красного окрашивания.
В присутствии фенола растворимость красителей в липидах повышается.
Метод Шморля для выявления липофусцина
1. Материал фиксируют в формалине, заливают в парафин или получают срезы на замораживающем микротоме.
2. Срезы промывают в дистиллированной воде.
3. Помещают срезы на 5 — 20 мин в реакционную смесь
[3 части 1 % раствора дихлорида железа смешивают с 1 частью 1 % раствора гексацианоферрата (III) калия; смесь используют в течение 30 мин после приготовления].
4. Срезы хорошо промывают в проточной воде.
В особенно важных случаях рекомендуется проводить микроскопию срезов, заключенных в воду.
5. Быстро обезвоживают в спиртах возрастающей концентрации, проводят через ксилол, заключают в бальзам.
Результат:
липофусцин и меланин окрашиваются в темно-синий цвет.
Кроме того, положительную реакцию дают аргентаффинные гранулы, а также ткани, содержащие активные SH-группы.
Примечание.
После п. 4 можно провести окрашивание ядер 1 % нейтральным красным в течение 3 мин.
Главная / Лекции 3 курс / Патологическая анатомия / Вопрос 12. Смешанные дистрофии. Часть 3 / 1. Нарушение обмена гематоидина, гематинов, гематопорфирина
1. Нарушение обмена гематоидина, гематинов, гематопорфирина
Гематоидин — не содержащий железа пигмент возникает при распаде эритроцитов и гемоглобина внутриклеточно, спустя 5-10 дней после гемосидерина, но в отличие от гемосидерина в клетках не остается и при их гибели оказывается свободно лежащим среди некротических масс.
Скопления гематоидина находят в более или менее старых гематомах, рубцующихся инфарктах, причем вдали от живых тканей — в центральных участках кровоизлияний, а не по периферии.
Гематины представляют собой окисленную форму гема и образуются при гидролизе оксигемоглобина.
К гематинам относят:
- гемомеланин (малярийный пигмент) возникает из гемоглобина под влиянием плазмодиев малярии, паразитирующих в эритроцитах;
- солянокислый гематин (гемин) возникает под воздействием на гемоглобин ферментов желудочного сока и соляной кислоты;
формалиновый пигмент считают производным гематина.
Гистохимические свойства этих пигментов идентичны.
Гематопорфирин — флюоресцирующий пигмент, содержит железо, не определяемое обычными гистохимическими методами.
В норме в небольшом количестве содержится в крови и в моче, играет роль антагониста меланина и повышает чувствительность кожи к свету. При нарушении обмена порфирина увеличивается его содержание в крови и в моче. Моча, содержащая большое количиство порфирина, становится красной. Пигмент обнаруживается также и в кале.
Эндогенные пигменты
Это состояние носит название порфирия.
Причины порфирии:
- интоксикации (отравления свинцом, сульфоналом, барбитуратами);
- авитаминоз РР (при пеллагре);
врожденные дефекты нарушения обмена.
При порфирии развиваются более или менее тяжелые симптомы повышенной чувствительности кожи к ультрафиолетовым лучам. На открытых частях тела — на лице, на руках, шее — возникают эритемы, пузыри, язвы на фоне глубокой атрофии кожи с ее депигментацией. Кости и зубы становятся коричневыми.
Далее по теме:
НАРУШЕНИЕ ОБМЕНА ГЕМАТОИДИНА, ГЕМАТИНОВ И ГЕМАТОПОРФИРИНА
Гематоидин— не содержащий железа пигмент, кристаллы которого имеют вид ярко-оранжевых ромбических пластинок или иголок, реже — зерен. Он возникает при распаде эритроцитов и гемоглобина внутриклеточно, спустя 5-10 дней после гемосидерина, но в отличие от гемосидерина в клетках не остается и при их гибели оказывается свободно лежащим среди некротических масс.
НАРУШЕНИЕ ОБМЕНА ГЕМАТОИДИНА, ГЕМАТИНОВ И ГЕМАТОПОРФИРИНА
Химически он идентичен билирубину.
Скопления гематоидина находят в более или менее старых гематомах, рубцующихся инфарктах, причем вдали от живых тканей — в центральных участках кровоизлияний, а не по периферии. Его образование связано с распадом клеток, т.е. с угасанием и прекращением жизнедеятельности в очаге кровоизлияния при недостаточном доступе кислорода. Особого клинического значения гематоидин не имеет.
Гематины представляют собой окисленную форму гема и образуются при гидролизе оксигемоглобина. Они имеют вид темно-коричневых или черных ромбовидных кристаллов или зерен, дают двойное лучепреломление в поляризованном свете (анизотропны), содержат железо в связанном состоянии.
К гематинам относят:
—гемомеланин (малярийный пигмент);
—солянокислый гематин (гемин);
—формалиновый пигмент.
Гистохимические свойства этих пигментов идентичны.
Гемомеланин (малярийный пигмент)— аморфный бурый пигмент, возникает из простетической части гемоглобина под влиянием плазмодиев малярии, паразитирующих в эритроцитах. Сходство малярийного пигмента с меланином чисто внешнее, а не химическое и с этой точки зрения применение синонима “гемомеланин” не оправдано. При разрушении эритроцитов малярийный пигмент попадает в кровь и подвергается фагоцитозу макрофагами селезенки, печени, костного мозга, лимфатических узлов, головного мозга (при малярийной коме). Эти органы приобретают аспидно-серую окраску. В них наряду с малярийным пигментом наблюдается отложение гемосидерина.
Солянокислый гематин (гемин)находят в геморрагических эрозиях и язвах желудка, где он возникает под воздействием на гемоглобин ферментов желудочного сока и соляной (хлористоводородной) кислоты. Слизь покрывающая дефекты слизистой оболочки желудка приобретает буро-черный цвет.
Формалиновый пигментв виде темно-коричневых игл или гранул встречается в тканях при фиксации их в кислом формалине (этот пигмент не образуется, если формалин имеет рН >6,0). Его считают производным гематина.
Гематопорфирин — флюоресцирующий пигмент, близкий по структуре билирубину, содержит железо, однако, не определяемое обычными гистохимическими методами. В норме в небольшом количестве содержится в крови и в моче, играет роль антогониста меланина и повышает чувствительность кожи к свету. При нарушении обмена порфирина увеличивается его содержание в крови (порфиринемия) и в моче (порфиринурия). Моча, содержащая большое количиство порфирина, становится красной. Пигмент обнаруживается также и в кале. Это состояние носит название порфирия.
Причины порфирии:
—интоксикации (отравления свинцом, сульфоналом, барбитуратами);
—авитаминоз РР (при пеллагре);
—врожденные дефекты нарушения обмена — porphyria congenita.
При порфирии развиваются более или менеее тяжелые симптомы повышенной чувствительности кожи к ультрафиолетовым лучам. На открытых частях тела — на лице, на руках, шее возникают эритемы, пузыри, язвы на фоне глубокой атрофии кожи с ее депигментацией. Кости и зубы становятся коричневыми.
Предыдущая13141516171819202122232425262728Следующая
Дата добавления: 2015-08-08; просмотров: 464;
ПОСМОТРЕТЬ ЕЩЕ:
Источник
